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本篇教你如何操作使用全自動固相萃取儀
更新時間:2022-10-22   點擊次數:1562次
  我想大家對全自動固相萃取儀都經不怎么陌生了,那么究竟該如何使用呢?今天就讓我們一起來了解一下,話不多說下面一起看看吧。
 
  全自動固相萃取儀的操作使用方法:
 
  1.選擇小柱或濾膜
 
  小柱或濾膜的大小與規格應視樣品中待測物的濃度大小而定。對于濃度較低的體內樣品, 一般應選用盡量少的固定相填料萃取較大體積的樣品。
 
  2.活化
 
  萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml 溶劑沖洗濾膜使填料保持濕潤, 因為填料干燥會降低樣品保留值,而各小柱的干燥程度不一,也會影響回收率的重現性。
 
  3.上樣
 
  一般可采取以下四種方法:
 
  (1) 用0.1mol/L 酸或堿調節, 使pH<3或pH>9, 離心取上層液萃取;
 
  (2)用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質后取上清液, 以水或緩沖液稀釋后萃取;
 
  (3)用酸或無機鹽沉淀蛋白質后取上清液, 調節pH 值后萃取;
 
  (4)超聲15min后加入水、緩沖液, 取上清液萃取。流速應控制為1ml/min, 流速快不利于待測物與固定相結合。
 
  4.淋洗
 
  反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液, 可在清洗液中加入少量有機溶劑、無機鹽或調節pH值。加入小柱的清洗液應不超過一個小柱的容積, 而SPE濾膜為5~10ml。
 
  5.洗脫
 
  應選用5~10ml離子強度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑。若需較高靈敏度, 則可先將洗脫液揮干后, 再用流動相重組殘留物后進樣。體內樣品洗脫后多含有水, 可選用冷凍干燥法。保留能力較弱的SPE 填料可用小體積、較弱的洗脫液洗下待測物,再用極性較強的HPLC 分析柱分析洗脫物。
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